長年にわたり、Creative Enzymesは様々な目的の研究のために酵素アッセイを実施してきました。私たちは、グローバル市場における酵素活性アッセイの最も信頼できるサービスプロバイダーであることを約束します。今日、Creative Enzymesは、特に高感度で知られるルミネセントアッセイによる酵素活性定量の分野でのリーディングカンパニーです。リクエスト提出日から最短でテスト結果を提供します。迅速なサービス、最高の顧客ケア、そして専念したアプローチにより、Creative Enzymesは最も好まれるサービスプロバイダーとなりました。

ルミネセントアッセイは、酵素が基質を反応生成物に変換し、その生成物が可視的な色を発生させるのではなく光子を放出することで酵素反応を監視する一般的な方法です。ルミネセンスは、物質が電子的に励起された状態から基底状態に戻る際に光を放出することとして説明されます。励起された中間体が安定した基底状態に戻ると、光子が放出され、これがルミネセント信号装置によって検出されるか、人間の目で観察されます。ルミネセンスの異なる形態（生物ルミネセンス、化学ルミネセンス、光ルミネセンス）は、励起状態に到達する方法が異なります。例えば、光ルミネセンスは単に蛍光であり、特定の波長の光によって励起が開始されます。生物ルミネセンス（BL）は、ルシフェリンやホタルルシフェラーゼなどの生物ルミネセント化合物を使用して生成されます。化学ルミネセンス（CL）は、化学反応によって特徴付けられる光です。化学ルミネセント物質は、酸化と触媒作用によって励起され、中間体を形成します。CLとBLは、低ノイズレベル、大きな検出範囲、迅速な応答などの特別な特徴により、蛍光測定法などの他の光を利用した検出原理に対して優れた強力な検出技術です。これらは、アナライトに関与する特定の反応によって光が放出されるという独自の利点を提供し、サンプルマトリックス成分による光散乱や背景放出からの干渉を回避します。広い動的範囲のおかげで、サンプルは希釈や分析手順の変更なしに数十倍の濃度で測定できます。さらに、光の放出の開始は通常数秒または数分で行われるため、CL/BL技術は非常に迅速です。

図2: 酵素のための化学ルミネセントアッセイ戦略。
参考文献: Kricka L J, Voyta J C, Bronstein I. Methods in enzymology, 1999, 305: 370-390.

CL酵素アッセイの主な利点は、従来の分光光度法アッセイ法に対する優れた感度です。2つの一般的なタイプのCL酵素活性アッセイが開発されています。最初のタイプでは、酵素が基質のCL分解を触媒するか、特別に設計された酵素基質からCL分子を放出して光を発生させます。2番目のタイプのアッセイは、酵素と酵素基質の反応の指標として、CL化合物を直接または間接的に使用します。

図3: 2-メチル-1-プロペニルベンゾエート基質を使用した酵素アッセイ。
参考文献: Kricka L J, Voyta J C, Bronstein I. Methods in enzymology, 1999, 305: 370-390.

酵素、特に加水分解酵素のためのCL基質の設計において大きな進展がありました。CL分子は、酵素によって認識される保護基を含むように修飾されます。基の酵素的除去により、CL分子または光を放出しながら分解する中間体が放出されます。放出強度、総光放出、または光放出の速度が測定され、酵素活性に関連付けられます。環状ジアシルヒドラジン、ルミノールは、一般的にその異性体であるイソルミノールやナフタレン-1,2-ジカルボン酸ヒドラジンなどの類似物と結合して、ホースラディッシュペルオキシダーゼのコサブストレートです。これはペルオキシダーゼ触媒酸化を受け、光の放出の強度（425 nm）はペルオキシダーゼ活性に比例します。近年、CL酵素アッセイにおける主要な進展の1つは、アダマンチル安定化アリール-1,2-ジオキセタンに基づく酵素基質のファミリーの設計です。さらに、アクリダンカルボキシレート、プロペニルエステル、インドール、イミドピラジンもCL酵素アッセイで使用されています。

化学ルミネセントアッセイは、異性化酵素とリガーゼを除くすべての主要な酵素クラスに利用可能です。一般的に、CL酵素アッセイは、比色法、蛍光法、または放射線測定法よりも感度が高く、多くのCLアッセイはサブアトモル検出限界を持っています。免疫アッセイや核酸アッセイにおける酵素ラベルのCLアッセイの成功は、感度、利便性、汎用性が向上した酵素アッセイの開発を目指して、さまざまなCL反応の探求を促進しています。Creative Enzymesは、CL酵素アッセイの注意点を十分に理解しており、クライアントに最高のクラスの酵素活性結果を提供しています。

数十年の研究経験と独自の技術を持つCreative Enzymesは、一流の酵素分析サービスで優れています。高品質でユニークなサービスへの情熱は、市場での評判を超えるものです。Creative Enzymesは、CL酵素アッセイを使用した酵素活性の決定を求める際に、最も信頼できるパートナーです。

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