Creative Enzymesは長年にわたり、さまざまな目的の研究のために酵素アッセイを実施してきました。私たちは、世界市場における最も信頼できる酵素活性アッセイのサービスプロバイダーであることを目指しています。現在、Creative Enzymesは酵素活性定量の分野、特に高感度で知られる発光アッセイにおいて、業界をリードする企業です。ご依頼の提出日から最短期間で試験結果をお届けします。迅速なサービス、最高のカスタマーケア、そして献身的なアプローチにより、Creative Enzymesは最も選ばれるサービスプロバイダーとなっています。

発光アッセイは、酵素が基質を反応生成物に変換し、可視色ではなく光子を放出することで酵素反応をモニターする一般的な方法です。発光とは、物質が電子的に励起された状態から基底状態に戻る際に光を放出する現象です。励起中間体が安定した基底状態に戻るとき、光子が放出され、発光信号装置で検出されたり、人間の目で観察されたりします。発光のさまざまな形態（生物発光、化学発光、光発光）は、励起状態への到達方法が異なります。例えば、光発光は単に蛍光であり、特定の波長の光によって励起が開始されます。生物発光（BL）は、ルシフェリンやホタルルシフェラーゼなどの生物発光化合物の使用によって生成されます。化学発光（CL）は、化学反応によって特徴づけられる光です。化学発光物質は、酸化および触媒作用によって中間体が形成され、励起されます。CLおよびBLは、低ノイズレベル、広い検出範囲、迅速な応答などの特長により、蛍光測定法など他の光を利用した検出原理よりも優れた強力な検出技術です。これらは、分析対象物に関与する特定の反応によって光が放出されるという独自の利点を持ち、サンプルマトリックス成分による光散乱やバックグラウンド発光の干渉を回避します。広いダイナミックレンジのおかげで、希釈や分析手順の変更なしに、数桁にわたる濃度範囲でサンプルを測定できます。さらに、発光の開始は多くの場合数秒から数分で起こるため、CL/BL技術は非常に迅速です。

図2: 酵素の化学発光アッセイ戦略。
参考文献: Kricka L J, Voyta J C, Bronstein I. Methods in enzymology, 1999, 305: 370-390.

CL酵素アッセイの主な利点は、従来の分光光度法アッセイ手法に比べて優れた感度です。2つの一般的なCL酵素活性アッセイが開発されています。1つ目は、酵素が基質のCL分解を触媒するか、特別に設計された酵素基質からCL分子を放出して発光を生じさせる方法です。2つ目のアッセイは、CL化合物を直接または間接的に、酵素と酵素基質間の反応の指示薬として使用します。

図3: 2-メチル-1-プロペニル安息香酸エステル基質を用いた酵素アッセイ。
参考文献: Kricka L J, Voyta J C, Bronstein I. Methods in enzymology, 1999, 305: 370-390.

特に加水分解酵素において、酵素用CL基質の設計は大きく進歩しています。CL分子は、酵素によって認識される保護基を含むように修飾されます。酵素的にこの基が除去されることで、CL分子または分解して発光する中間体が放出されます。発光強度、総発光量、または発光速度が測定され、酵素活性と関連付けられます。環状ジアシルヒドラジドであるルミノールは、その異性体イソルミノールやナフタレン-1,2-ジカルボン酸ヒドラジドなどの類似体とともに、ホースラディッシュペルオキシダーゼの共基質です。これはペルオキシダーゼ触媒酸化を受け、グロータイプの発光強度（425 nm）はペルオキシダーゼ活性に比例します。近年、CL酵素アッセイにおける主な進展の一つは、アダマンチル安定化アリール-1,2-ジオキセタンを基盤とした酵素基質ファミリーの設計です。さらに、アクリダンカルボキシレート、プロペニルエステル、インドール、イミドピラジンもCL酵素アッセイで使用されています。

化学発光アッセイは、アイソメラーゼとリガーゼを除くすべての主要な酵素クラスに利用可能です。一般的に、CL酵素アッセイは比色法、蛍光法、または放射能測定法よりも高感度であり、多くのCLアッセイはサブアトモール検出限界を持っています。免疫アッセイや核酸アッセイにおける酵素ラベル用CLアッセイの成功は、感度、利便性、汎用性を向上させた酵素アッセイの開発を目指して、さまざまなCL反応の継続的な探求を促進しています。Creative EnzymesはCL酵素アッセイの注意点を十分に理解しており、クライアントに最高水準の酵素活性結果を提供します。

数十年にわたる研究経験と独自技術により、Creative Enzymesは一流の酵素分析サービスで卓越しています。高品質かつ独自のサービスへの情熱は、市場での評判を上回るものです。Creative Enzymesは、CL酵素アッセイを用いた酵素活性測定をお探しの際、最も信頼できるパートナーです。

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