G3m上の不動化TLCK-キモトリプシン

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番号

NATE-1770

説明

α-キモトリプシンは、疎水性アミノ酸（L-チロシン、L-フェニルアラニン、L-トリプトファン）のカルボキシル基でペプチド、アミド、エステルを優先的に加水分解しますが、ロイシル、メチオニル、アスパラギニル、グルタミル残基の結合も含まれます。
G3m: デキストランに固定化されたCRカラムあたり25 µgのα-キモトリプシン。
1. CRカラムあたり4ユニット固定化。
このCRカラムは、アプリケーションごとに少なくとも100 µgのチューブリンを切断します；5 µg/分のBSAをSDSなしで切断しますが、0.1% SDSの存在下では少なくとも45 µg/分のBSAを切断します。
Nr. 5 保存バッファー: 50 mM Tris/HCl, pH 7.5
Nr. 5 反応バッファー: 50 mM Tris/HCl, pH 7.5; 0.1% SDSの存在下でも活性
Nr. 6 洗浄バッファー: 50 mM Tris/HCl, 1 M NaCl, pH 7.5

ソース

牛膵臓

酵素委員会番号

EC 3. 4. 21. 1

ストレージ

4 °C

同義語

EC 3. 4. 21. 1; α-キモトリプシン; キモトリプシン A および B; アルファ-キマールオフ; アバザイム; キマール; キモテスト; エンゼオン; キマール; キモトレース; アルファ-キマール; アルファ-キモトリプシン A; アルファ-キモトリプシン; キモトリプシン

プロトコル

1. 配達されたバッファーを（各2 ml以上）無菌の二重蒸留水で希釈します。
1回のアプリケーションには以下が必要です：
1 mlの10x反応バッファーと9 mlの二重蒸留水
2 mlの5x洗浄バッファーと8 mlの二重蒸留水
1 mlの10x保存バッファーと9 mlの二重蒸留水
基質は反応バッファーに入れておく必要があります。
2. CRカラムを10 mlの反応バッファーで平衡化します。
10 mlの反応バッファーをシリンジに入れ、重力で反応バッファーをカラムを通して上部フィルターまで流します。バッファーの流れが非常に遅い場合は、シリンジで圧力をかけてください。
3. 反応バッファー中の基質溶液をロードします。
小さな体積（< 70 µl）：CRカラムをベンチトップ遠心分離機で5秒間回転させます（2000 rpmで十分です）。基質溶液がマトリックス材料に入るのを待ちます。
大きな体積：基質溶液をカラムを通して流します。
流量：最大70 µl/分
基質をカラム内に約1分間室温で保持します。基質を再度カラムに適用するか、長時間インキュベートすることで、より高い回転率が得られます。
4. 製品溶液を溶出します。
小さな体積（< 70 µl）：カラムから製品を遠心分離します。
大きな体積：基質をカラムを通して流し、残留溶液をマトリックスから遠心分離します。
注意：700ダルトン未満の分子は7 mlの反応バッファーで溶出する必要があります。
カラムが乾燥しても害はありません。
5. カラムを10 mlの洗浄バッファーで洗浄します。
6. カラムを10 mlの保存バッファーで平衡化します。
カラムは4°Cで保管します。 CRカラムを凍結させないでください！

酵素

カタログ	製品名	EC番号	CAS番号	ソース	価格
NATE-1754	不動化牛チモトリプシン	EC 3. 4. 21. 1		牛膵臓	お問い合わせ
NATE-1769	F7m上の不動化TLCK-キモトリプシン	EC 3. 4. 21. 1		牛膵臓	お問い合わせ
NATE-0746	ネイティブ牛α-キモトリプシン	EC 3.4.21.1	9004-07-3	牛膵臓	お問い合わせ
NATE-0747	ネイティブヒトα-キモトリプシン	EC 3.4.21.1	9004-07-3	人間の膵臓	お問い合わせ

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