G3m上の不動化パパイン

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番号

NATE-1765

説明

パパインは広い特異性を持ち、ほとんどのタンパク質基質を分解します。
優先的切断: arg-, lys-, phe-X。パパインはエステラーゼ活性も持っています。
G3m: デキストラン上のCRカラムごとに25 µg (0.6ユニット) のパパインが固定化されています。
このCRカラムは、アプリケーションごとに少なくとも20 µgのチューブリンを消化します。
Nr. 7 保存バッファー: 50 mM Tris/HCl, 4 mM EDTA, pH 7.5
Nr. 52 反応バッファー: 50 mM リン酸塩, 4 mM EDTA, pH 6.0
Nr. 53 洗浄バッファー: 50 mM リン酸塩, 4 mM EDTA, 1 M NaCl, pH 6.0
酵素は3.5 mMのシステインの存在下でより活性です。

ソース

パパイヤラテックス

酵素委員会番号

EC 3. 4. 22. 2

ストレージ

4 °C

同義語

パパヨチン; サメトリン; ベラルドン; パパイン; パパイヤペプチダーゼ I; パパイン; EC 3. 4. 22. 2; 9001-73-4

プロトコル

1. 配達されたバッファーを（各2 ml以上）無菌の二重蒸留水で希釈します。
1回のアプリケーションには以下が必要です：
1 mlの10x反応バッファーと9 mlの二重蒸留水
2 mlの5x洗浄バッファーと8 mlの二重蒸留水
1 mlの10x保存バッファーと9 mlの二重蒸留水
基質は反応バッファーに入れておく必要があります。
2. CRカラムを10 mlの反応バッファーで平衡化します。
10 mlの反応バッファーをシリンジに入れ、重力で反応バッファーをカラムを通して上部フィルターまで流します。バッファーの流れが非常に遅い場合は、シリンジで圧力をかけてください。
3. 反応バッファー中の基質溶液をロードします。
小さな体積（< 70 µl）：CRカラムをベンチトップ遠心分離機で5秒間回転させます（2000 rpmで十分です）。基質溶液がマトリックス材料に入るのを待ちます。
大きな体積：基質溶液をカラムを通して流します。
流量：最大70 µl/分
基質をカラム内に約1分間室温で保持します。基質を再度カラムに適用するか、長時間インキュベートすることで、より高い回転率が得られます。
4. 製品溶液を溶出します。
小さな体積（< 70 µl）：カラムから製品を遠心分離します。
大きな体積：基質をカラムを通して流し、残留溶液をマトリックスから遠心分離します。
注意：700ダルトン未満の分子は7 mlの反応バッファーで溶出する必要があります。
カラムが乾燥しても害はありません。
5. カラムを10 mlの洗浄バッファーで洗浄します。
6. カラムを10 mlの保存バッファーで平衡化します。
カラムを4°Cで保管します。
CRカラムを凍結させないでください！

酵素

カタログ	製品名	EC番号	CAS番号	ソース	価格
NATE-1864	不動化パパイン（アガロース樹脂）	EC 3.4.22.2			お問い合わせ
NATE-0506	ネイティブパパイヤラテックスパパイン	EC 3.4.22.2	9001-73-4	パパイヤラテックス	お問い合わせ
DIS-1029	パパイン		9001-73-4	カリカ・パパイヤ	お問い合わせ
BAK-1731	パパイン		9001-73-4		お問い合わせ

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