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研究、診断および産業用の酵素

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ネイティブジャックビーンα (1-2,3,6)-マンノシダーゼ

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番号
NATE-0438
説明
α-マンノシダーゼは酸性加水分解酵素で、植物の液胞に存在し、N-結合型糖タンパク質のターンオーバーに関与していると考えられています。α-マンノシダーゼはBリンパ球の増殖を抑制することが示されています。Canavalia ensiformisからのα-マンノシダーゼは、各サブユニットが44 kDaと66 kDaの2つの成分を含む2つのサブユニットからなるトリマーです。
略語
マンノシダーゼ、ナチュラル（ジャックビーン）
ソース
ジャックビーンズ
フォーム
20 mM Tris-HCl、20 mM NaCl、pH 7.5の無菌フィルター処理された溶液。
アクティビティ
≥ 10 U/ml
分子量
約190 kDa ダルトン。
純度
汚染するグリコシダーゼ活性は、p-ニトロフェニルグリコシド基質を使用して測定され、酵素活性の0.001%を超える場合に報告されます。
特異性
酵素は広範な基質特異性を持ち、オリゴ糖や糖タンパク質からα (1-2, 3, および 6)-結合マンノース残基を切断します。しかし、酵素は1-2, 3>6-結合残基に対していくつかの動力学的好みを示します。約50 U/mlの酵素濃度と37°Cでの延長インキュベーション時間（最大18時間）を使用することで、複合型高マンノースグリカンからすべてのα-結合マンノースユニットを完全に除去することができ、最終生成物としてコアトリサッカライドであるMan β (1,4)-GlcNAc β (1,4)-GlcNAcが得られます。グリカン配列決定研究を迅速化するために、ジャックビーン酵素のα (1-6)-結合マンノース残基に対する鈍い活性は、1-6結合を迅速に切断するXanthomonas mannihotis由来のアルファマンノシダーゼと組み合わせて使用することで克服できます。酵素のメカニズムは調査されており、2つの炭水化物残基間のグリコシド結合を切断し、安定した酵素基質中間体を形成することが示されています。酵素結合マンノース残基は、他の炭水化物受容体に合理的な効率で転送されることができます。このようにして、酵素は定義されたアノメリック構成を持つ新しいマンノース含有グリカンの合成に利用できます。興味深いことに、ジャックビーンマンノシダーゼは高マンノース型構造を含む糖タンパク質です。明らかに、これらのグリカンサイドチェーンはポリペプチドによって触媒部位から遮蔽されているため、酵素にアクセスできません。炭水化物サイドチェーンは、適切なタンパク質の折りたたみと触媒活性の維持に必要です。酵素は活性と最適な安定性のためにZn2+イオンを必要としますが、インキュベーションバッファーにZn2+を追加する必要は通常ありません。
最適pH
pH 4.0-4.5
安定性
酵素は2-8°Cおよび-20°Cで安定しています。酵素はpH 5.5未満では不安定であり、Zn2+イオンが存在しない限りそうです。37°Cで17時間の間、pH 6.0-8.5の範囲で安定しています。Ag+およびHg2+は酵素活性の強力な阻害剤です。
ストレージ
2-8°Cで保管してください。翌日配送のために冷却パックで発送されます。
同義語
α-マンノシダーゼ; α-D-マンノシダーゼ; p-ニトロフェニル-α-マンノシダーゼ; α-D-マンノピラノシダーゼ; 1,2-α-マンノシダーゼ; 1,2-α-D-マンノシダーゼ; エキソ-α-マンノシダーゼ; EC 3.2.1.24; 9025-42-7; マンノシダーゼ
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