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マイクロスケールサーモフォレシス酵素アッセイ

酵素産業の発展を見据え、Creative Enzymesは常に最新技術をいち早く習得してきた企業の一つです。酵素活性試験における強力な技術力は、他のサービスプロバイダーとの差別化を実現しています。当社のチームは、総合的な専門知識を持つ科学者チームとともに、中央集約型の最新研究施設を中心に構築されています。お客様のあらゆる試験ニーズに対応するため、数多くの信頼性の高い手法を確立しています。microscale thermophoresis (MST)は、生体分子間相互作用を定量化するために開発された新しい技術です。さまざまなモデルシステムを用いることで、MSTの応用には結合化学量論や結合様式の決定、タンパク質の変性解析、熱力学解析などが含まれます。Creative Enzymesは主に酵素動態解析への応用を展開しており、MSTを用いた優れた活性測定サービスを提供しています。

温度勾配に沿って分子が移動する現象である熱泳動(thermophoresis)は、1856年にCarl Ludwigによって初めて記述されました。開発されるとすぐに、microscale thermophoresis (MST)はタンパク質や低分子の相互作用をモニタリングする画期的な手法となりました。MSTは、結合イベントによって誘導される分子の立体構造、電荷、サイズのわずかな変化を熱泳動的に検出することで、生体分子間相互作用の定量化を可能にします。したがって、MSTは低分子とタンパク質、基質と酵素、リガンドとリポソームの結合などのイベントを検出できます。さらに、MSTはisothermal titration calorimetry (ITC)やsurface plasmon resonance (SPR)などの一般的な非蛍光法に比べ、表面固定化や大量サンプル消費を回避できるという利点もあります。加えて、MSTはほぼすべてのバッファー中で実施可能であり、血漿や細胞溶解液中でも利用できます。最近の技術進歩により、トリプトファン含有タンパク質の内在性蛍光を利用して熱泳動を追跡することも可能となり、完全にラベルフリーかつ固定化フリーで分子間相互作用を研究する新しいアプローチが提供されています。

生物医学研究において、MSTは酵素活性の測定における重要な手法となっています。MST試験の高精度に加え、その他の特徴や利点は以下の通りです。

他の酵素試験法とは異なり、MSTではpM/nM濃度で測定でき、反応溶液もごく少量(<4ul)で済みます。

MST測定は短時間で完了します。測定対象の酵素はさまざまな溶液中に存在できるため、試験前に酵素を精製する必要がなく、測定温度も任意に設定可能です。

MSTを用いて酵素動態を解析できることを示す事例もすでにいくつか報告されています。

Kinetics of the enzymatic degradation of DNA by DNase I using different MST-based approaches. (A) Schematic representation of the Mg2+-dependent degradation of DNA by DNase I. (B) Real-time measurement of DNA degradation. 図:DNase IによるDNAの酵素分解動態を異なるMSTベースの手法で解析した例。(A)DNase IによるMg2+依存的なDNA分解の模式図。(B)DNA分解のリアルタイム測定。

MST装置の精度が実験の要であり、その感度と再現性が結果の信頼性を左右することは明らかです。Creative Enzymesは、最先端のMST機器を用いて酵素試験を実施し、高精度を保証しています。MSTに関する豊富な専門知識とプロフェッショナルなオペレーションを組み合わせることで、顧客に大きな満足をもたらしています。

Creative Enzymesは、先進的な技術と機器を用いて酵素活性定量の改善と最適化に取り組んでいます。コストパフォーマンスに優れたMSTアッセイの第一選択であることは間違いありません。本試験に関するご質問がございましたら、どうぞお気軽にお問い合わせください。


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