クリエイティブエンザイムズは、製薬、バイオテクノロジー、診断業界のクライアントのニーズに応える酵素活性分析に特化した高品質のバイオアナリティカルサービスと契約研究を提供しています。長年にわたり、クリエイティブエンザイムズはフルオロメトリック酵素アッセイにおいて最も経験豊富な企業です。私たちの測定能力は広範で、酸化還元酵素、転移酵素、加水分解酵素、リアーゼ、異性化酵素、リガーゼなど、あらゆる種類の酵素をカバーしています。私たちは、特定の問題の解決、操作の最適化、酵素活性測定の方法開発のプロセスを通じて、常に顧客と密接に連携しています。

蛍光は、吸収された放射線の波長が常に放出された（蛍光された）波長よりも低い（エネルギーが高い）という現象です。フルオロメトリック酵素アッセイは、基質と生成物の蛍光スペクトルの違いを利用して酵素反応を測定します（図1）。光を吸収すると、基底状態（S₀）のフルオロフォアが高エネルギーの一重項状態に励起されます。ピコ秒の時間スケールで発生する急速な熱化により、励起された分子は第一励起状態（S₁）の最低振動レベルに留まります。この励起された一重項状態は、ナノ秒のオーダーで短時間保持され、その後、光子の放出に伴って基底状態に戻ります。この励起状態から基底状態への遷移は通常、励起プロセスよりもエネルギーが低いため、放出はしばしば励起よりも長い波長で行われます。この波長の違いはストークスシフトとして知られています。実質的に、すべての蛍光データは、励起スペクトル、放出スペクトル、量子収率、蛍光寿命、放出の異方性または偏光のいずれかの5つのパラメータで説明できます。

図1: ペリン-ジャブロンスキー図。S₀は基底状態で、S₁とS₂は電子的に励起された状態です。
参考文献: Eccleston J F, Hutchinson J P, Jameson D M. 医薬品化学の進展, 2005, 43: 19-48.

フルオロメトリックアッセイは、酵素反応の動力学的メカニズムの決定に広く使用されており、高スループットスクリーニングのための動力学的アッセイの構成にも使用されます。蛍光ベースのアッセイで測定するには、反応が非蛍光基質から蛍光生成物を生成するか、その逆で進行する必要があります。最初のケースの例は、加水分解アッセイにおいて、非蛍光のブチルエステルを基質として使用し、エステル結合の酵素的切断により高蛍光のレゾルフィンが生成されることです。後者の例は、NAD(P)Hの酸化を含む任意の酵素反応で、非蛍光のNAD(P)⁺が生成されます。蛍光共鳴エネルギー移動（FRET）も、酵素反応が基質内の2つのフルオロフォアの距離や方向を変える場合に酵素アッセイで利用され、ドナーまたはアクセプターの観測された蛍光強度が変化します。

フルオロメトリック酵素アッセイは、一般的に分光光度測定アッセイよりもはるかに感度が高いですが、不純物や多くの蛍光化合物が光にさらされたときの不安定性による干渉を受ける可能性があります。アッセイの高感度は、通常、人間の患者から得られる小さな組織、細胞、または液体の標本で行われる診断酵素測定の数が増加している現在の段階で特に価値があります。フルオロメトリックアッセイは、反応混合物の小型化にも特に適しています。このようにして、感度のさらなる大幅な向上が達成され、酵素および蛍光基質のサンプルの需要が減少します。後者の保存は、非常に高価または希少な蛍光基質の出現に伴い重要になっています。

最新の知識と高度な機器を備えたクリエイティブエンザイムズは、すべてのタイプの酵素の活性レベルの定量を提供する信頼性の高いフルオロメトリック酵素アッセイを顧客に提供する自信があります。最高品質のサービスを常に追求することで、クリエイティブエンザイムズは数万の顧客の信頼を得ています。全体として、クリエイティブエンザイムズは、顧客満足度の最高レベルを達成し、サービスと品質管理を常に改善することにコミットしています。

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