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カロリメトリック酵素アッセイ

高度な技術と酵素に関する広範な知識を持つCreative Enzymesは、従来の研究ニーズと独自の研究ニーズの両方に対して信頼性の高い酵素活性アッセイを提供しています。当社の試験サービスは、高品質と迅速なターンアラウンドで有名であり、多くの専門家や科学者によって支持されています。さまざまな酵素研究を促進するために、Creative Enzymesは異なる研究要求をサポートするための酵素活性測定のさまざまなアプローチを提供しています。分光光度法や比色法などの比較的理解されている方法に加えて、Creative Enzymesは最新の技術と最先端の機器を導入し、より高度な測定を開発しています。最も正確な試験方法の一つとして、比熱測定アッセイは複数の生物学的分野で利用されています。私たちは、等温滴定熱量測定を使用した酵素活性アッセイサービスを誇りを持って開始します。

等温滴定熱量計(ITC)は、20年前に業界に導入されて以来、より広く使用されるようになりました。現在、ITCは酵素への結合親和性を決定するための広く採用された方法です。基本原理は、一定温度での二分子結合相互作用に対するエンタルピー変化を直接測定することです。この技術は、時間の経過に伴って放出または吸収される熱を測定し、反応する分子の量を定量化するための普遍的で便利な方法論であり、結合熱力学や反応速度を測定することができます。

この技術の普遍的な性質は、これまでにITCを使用して調査されたさまざまなシステムに反映されています。最近のレビューでは、タンパク質–薬物、薬物–DNA、タンパク質–DNA、タンパク質–炭水化物相互作用の研究におけるこの技術の有用性が説明されています。さらに、ITCはリガンドの分子量によって制限されることはありません。他の活性分析方法と比較して、ITCには利点があります。一般的に使用される分光光度法や蛍光アッセイは、基質または生成物の光吸収または蛍光を測定して酵素活性を決定します。しかし、多くの基質や生成物は分光学的に活性ではありません。連結アッセイについては、別の反応を連結し、前の反応の生成物を後の反応の基質として使用するため、追加の変数の導入により決定の精度が低下します。小さなリガンドによる酵素阻害の研究では、従来の方法が小さなリガンド自体の吸収または蛍光のために信頼性を損なう可能性があります。ストップフロー技術は正確ですが、ルーチン分析には時間がかかり高価です。ほぼすべての化学物質の内在的な特性である放出または吸収される熱を利用することで、ITCは分析対象のシステムの修正やラベリングを必要としません。さらに、この技術は簡単で迅速であり、少量の材料を必要とし、溶液中で実施できます。ITCは、システムの修正やラベリングを必要とせずに酵素反応を特性化するための信頼性が高く迅速な方法です。

しかし、すべての試験方法には限界があることは例外ではありません。良好な信号対雑音比は、反応がITCセル内で十分な熱を生成するのを許す速度で進行する場合にのみ得られます。これは通常、kcatが1min-1より高いシステムで達成されます。すべての酵素系の内在的な違いと異なる反応によって生成される異なる熱を考慮すると、最適な運転条件を事前に定量化することはできません。プロセス中には、分析対象のシステムに応じて実験条件を選択する際に注意が必要です。Creative Enzymesの豊富な経験は、ITCアッセイにおける適切な分析プロセスの確立に貢献します。さらに、機器への高い依存性を考慮し、Creative Enzymesは正確な結果を提供するために、最先端の機器のみを使用しています。

酵素反応を研究するための等温滴定熱量計の概略図。図:酵素反応を研究するための等温滴定熱量計の概略図。
参考文献: Luca Mazzei et al. J. Vis. Exp. 2014, (86), e51487.

酵素活性アッセイの改善をリードするCreative Enzymesは、各顧客に対してより信頼性の高いテストを提供することを最終目標としています。結果は、優れた品質と高い再現性で保証されています。当社のITC酵素アッセイサービスは、あなたの研究を大いに加速させるでしょう。技術的な懸念がある場合は、専門的なサポートのためにお問い合わせください。


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