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比色酵素アッセイ

高度な技術と酵素に関する豊富な知識を活かし、Creative Enzymesは、従来型および独自の研究ニーズの両方に対応した信頼性の高い酵素活性アッセイを提供しています。当社の試験サービスは、高品質かつ迅速な対応で知られており、多くの専門家や科学者から支持されています。さまざまな酵素研究を促進するため、Creative Enzymesは、異なる研究要求に対応するための多様な酵素活性測定法を提供しています。よく知られている分光光度法や比色法などの方法に加え、Creative Enzymesは最新技術と最先端機器を導入し、より高度な測定法を開発しています。最も正確な試験方法の一つとして、熱量測定アッセイは複数の生物学分野で利用されています。当社は等温滴定熱量測定法を用いた酵素活性アッセイサービスを自信を持ってご提供いたします。

等温滴定熱量計(ITC)は、20年前に業界に導入されて以来、より広く利用されるようになりました。現在、ITCは酵素への結合親和性を測定するための一般的な方法として採用されています。基本原理は、一定温度下での二分子間結合相互作用におけるエンタルピー変化を直接測定することです。この技術は、時間経過に伴う発熱または吸熱を測定するため、結合熱力学などの反応分子量の定量や反応速度の測定において、汎用的かつ便利な手法となっています。

この技術の汎用性は、これまでITCを用いて解析された多様なシステムに反映されています。最近のレビューでは、タンパク質–薬物、薬物–DNA、タンパク質–DNA、タンパク質–糖質相互作用の研究における本技術の有用性が記載されています。さらに、ITCはリガンドの分子量による制限を受けません。他の活性分析法と比較して、ITCには独自の利点があります。一般的に使用される分光光度法や蛍光アッセイは、基質や生成物の光吸収や蛍光を測定して酵素活性を判定しますが、多くの基質や生成物は分光学的に活性ではありません。カップルドアッセイの場合、別の反応を組み合わせ、前反応の生成物を後反応の基質とするため、追加の変数が導入されることで測定精度が低下します。小分子リガンドによる酵素阻害の研究では、従来法では小分子リガンド自体の吸収や蛍光により信頼性が損なわれる場合があります。ストップドフロー技術は高精度ですが、日常的な分析には時間とコストがかかります。ほぼすべての化学物質が持つ発熱または吸熱という本質的特性を利用するITCは、分析対象システムの修飾や標識を必要としません。さらに、この技術はシンプルかつ迅速で、少量の試料で溶液中にて実施可能です。ITCは、システムの修飾や標識を必要とせず、酵素反応を特性評価するための信頼性が高く迅速な方法です。

しかし、すべての試験法に限界があることは例外ではありません。良好なシグナル対ノイズ比は、反応がITCセル内で機器の検出限界を超える十分な熱を発生させる速度で進行する場合にのみ得られます。これは通常、kcatが1min-1を超えるシステムで達成されます。各酵素系の本質的な違いや反応ごとに発生する熱量の違いを考慮すると、最適な運転条件を事前に定量化することはできません。実験中は、分析対象システムに応じて実験条件を選択する必要があります。Creative Enzymesの豊富な経験は、ITCアッセイにおける適切な分析プロセスの確立に貢献します。さらに、機器への高い依存性を考慮し、Creative Enzymesは最先端の機器のみを使用して正確な結果を提供しています。

酵素反応を研究するための等温滴定熱量計の模式図。図: 酵素反応を研究するための等温滴定熱量計の模式図。
参考文献: Luca Mazzei et al. J. Vis. Exp. 2014, (86), e51487.

酵素活性アッセイの進歩をリードするCreative Enzymesは、常にお客様一人ひとりにより信頼性の高い試験を提供することを究極の目標としています。結果は卓越した品質と高い再現性が保証されています。当社のITC酵素アッセイサービスは、お客様の研究を大幅に加速させます。技術的なご質問がございましたら、ぜひ当社までご相談ください。


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